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请问如何鉴别糖蛋白上的糖的类型呀?

相关实验:蛋白质糖基化分析

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陈文豪平邑

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3 个回答

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你好几和户

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先做SDS-PAGE,然后进行质谱分析,得出质量指纹谱,然后区别类型。

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bamboopiggy

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糖基一般连接在4种氨基酸上,分为两种:N-连接的糖基化(N-linked glycosylation):与天冬酰胺残基的NH₂连接,连接的糖为N-乙酰葡糖胺;O-连接的糖基化(O-linked glycosylation):与Ser、Thr和Hyp的OH连接,连接的糖为半乳糖或N-乙酰半乳糖胺,在高尔基体上进行O-连接的糖基化。

目前糖分析的研究技术主要分为两大部分:分离富集亲和技术、糖蛋白鉴定/糖基化位点确定方法。其中分离富集亲和技术包括:①凝集素亲和技术;②肼化学富集法;③亲水色谱法;④β- 消除米氏加成反应,糖蛋白鉴定 / 糖基化位点的确定方法包括:① PNGase F酶法;②Endo H酶法;③三氟甲基磺酸(trifluoromethananesulphonic acid,TFMS)法。

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Eason老歌迷

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常利用高碘酸2Schiff试剂染色法鉴定电泳凝胶中的糖蛋白。高碘酸是一种氧化剂,能将多糖残基中的二醇基(CHOH2CHOH) 氧化为二醛(CHO2CHO) ,二醛能与希夫试剂( Schiff Reagent)反应生成红色不溶性复合物。硝酸银染色是一种灵敏度极高的蛋白质染色法,而且也可以用于对蛋白质复合物分子中的糖类进行染色,糖类的二醇基被高碘酸氧化为醛基后可与银胺离子结合 具体步骤参考文献:刘翠芳, 高碘酸2硝酸银染色法鉴定糖蛋白,2006年。

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