为什么用His的抗体杂出了GST的条带？

小镇少年在学习

2022-07-12

有帮助

可以考虑换个his的抗体，his抗体也是识别HHHHHH，如果你目的蛋白里面有两三个连续的，然后抗体特异性又不好，也是可以识别的。

Miracle星

2022-07-11

有帮助

我觉得60KD左右那条带应该是表达菌株的本底表达的，但是确实会被诱导。我也是做GST的表达，现在做的还是不好，但遇到过你这种情况，并且很明显,60KD左右的带在量上超过了我的目的蛋白（也是80-90）；并且，有一次，我意外的发现我做的另一个His的蛋白也有这条带（表达菌株相同）

所以，我觉得这个应该是该菌株本身就有的；

可能是这个蛋白本身也是诱导型表达，能被IPTG诱导。

Eason老歌迷

2022-07-10

有帮助

听说pGEX-4T-1载体表达的蛋白会有His tag表达。GST里是有组氨酸的，但是都是分散的。建议你纯化一下在做wb

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为什么用His的抗体 杂出了GST的条带？