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GST pull-down 分析

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

蛋白质-蛋白质相互作用在诸如生物催化、转运、信号传导、免疫、细胞调控等多种生命过程起着重要的作用,因此对这种作用的研究对于了解生命活动规律具有深远意义。GST pull-down 分析主要用于蛋白质-蛋白质相互作用研究。

原理

GST pull-down 技术原理是利用 GST 对谷胱甘肽偶联球珠的亲和性,从非相互作用蛋白质溶液中纯化相互作用蛋白质的方法。它通常有两种应用:确定 GST 融合钓饵蛋白与未知蛋白间新的相互作用,以及证实钓饵蛋白质与已知蛋白质之间可能的相互作用。


前者需要用直接 SDS-PAGE(高丰度靶蛋白)或同位素标记后的 SDS-PAGE(低丰度靶蛋白)再偶联质谱等技术以确定靶蛋白的「身份」;后者则可用针对已知靶蛋白的抗体进行 Western 印迹检测。

应用

GST pull-down 分析主要用于蛋白质-蛋白质相互作用研究。

来源:丁香实验团队

操作方法

GST pull-down 分析

蛋白质-蛋白质相互作用在诸如生物催化、转运、信号传导、免疫、细胞调控等多种生命过程起着重要的作用,因此对这种作用的研究对于了解生命活动规律具有深远意义。GST pull-down 分析主要用于蛋白质-蛋白质相互作用研究。

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