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丁香通

请问这个pull down结果图怎么看

相关实验: GST pull-down 分析

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好可口一颗小柠檬

应该是为了证明在HCT116和RKO两种结肠癌细胞中ASAP可以和ATP5A、5C互作,但图B、C是什么意思呀,为什么要在HEK293T细胞中做?结果搞怎样解读呢?(刚刚接触科研,请求老师们解答,谢谢!!)

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3 个回答

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天一湖医者

有帮助

你的这个问题图片没有显示啊是忘记传图片了。HEK293细胞生长迅速,胰蛋白酶化速度快。

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bamboopiggy

有帮助

没看到图,全靠猜了,应该是在293T中过表达了ASAP以及ATP5A、5C,然后用抗体互相拉,证明他们之间有相互结合。至于里面写total input的,是全细胞裂解液,293T细胞中,这几个基因过表达成功。

至于用293T细胞,是因为293是一个各种蛋白表达量都比较高的工具细胞。

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dxywode

有帮助

GST相当于阴性对照,拉下⽬的蛋⽩的量是0%。input相当于阳性对照,含有⽬的蛋⽩100%。实验组就是GST-Atrogin-1-wt,在严格控制反应蛋⽩的量时,可以看出其作⽤强弱

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