magicmask
inventbiotech
这种情况可以说明WB操作没问题,需要考虑目标蛋白一抗,目标蛋白如果是外源性表达,需要找一下表达条件,载体。内源性表达,就需要考虑蛋白提取的时候是不是提取出来了,尤其是表达在细胞核细胞器和细胞质膜上的蛋白。提取时如果是用RIPA提取的,很容易将这些部位的蛋白丢失在RIPA的不可溶性组分里。还有一种情况就是这个目标蛋白表达丰度特别低,需要针对于所在部位进行富集再行WB检测
balalaLy
说明你wb操作是没有问题的,但目的蛋白的表达量太低或者抗体有问题,需要增加上样量,调整抗体浓度或者换抗体
bamboopiggy
1.抗体不好使,2,band的出的位置和实际大小有区别,切错膜了。
Eason老歌迷
有可能是胶切错了,使得目的条带遗漏。也有可能是组织蛋白表达量太少了,条带显示不清,因为内参恒定表达。