WB结果中可能出现有目标蛋白条带，但是目标条带在膜上颜色较浅，请问这是什么原因呀？

转膜不充分 规范转膜的操作；优化电转条件；可将两张膜叠加在一起，防止转膜过度，或使用小孔径膜

洗膜过度 洗膜时间不宜过长，加入的去垢剂不宜过强或过多，减少洗膜次数，洗膜时间和温度

封闭过度 减少封闭时间，试用不同的封闭液

曝光时间过短 延长曝光时间，如使用化学发光成像系统，可调整显示灰度值

抗体染色不充分 延长孵育时间或增加抗体浓度

抗体问题 抗体浓度低 增加抗体浓度

抗体和抗原亲和力不足 增加抗体浓度

抗体活性不足 使用有效期内的抗体，分装保存，避免反复冻融取用，工作液现用现配。

抗原问题 抗原量不足 增加上样量

缓冲液问题 缓冲液中含有叠氮钠 叠氮钠是一种 HRP 的抑制剂，缓冲液不能使用叠氮钠作为防腐剂。

可能你的蛋白浓度不够或者一抗浓度太低

抗体原因，你把抗体浓度加大一倍试试

可能是抗体活性较低，选择在有效期内的抗体；工作液现配现用，避免在长时间内放置

抗体浓度过低，可以提高抗体浓度

抗体和抗原亲和力较低，换抗体

第一种可能是它本来表达量就不高，第二可能是你上样量少，可以试试增大一下上样量，然后延长一下曝光时间再试试

有不少原因可以导致，你的封闭时间太长了，你转膜时间短，蛋白没完全转膜上，洗膜洗时间太长了