周末也要努力呀
有人做过细菌成分的WB吗?内参如何选择呢?裂解蛋白跟细胞一样吗?一般都选哪个蛋白做内参啊?谢谢
bamboopiggy
我当时是做蛋白纯化裂的菌,可以直接用裂细胞的lysis裂就可以,但是内参,我没有做过,你要不做个蛋白定量试试
秋秋欣欣
细菌跑和细胞是一样的,毕竟细菌也是细胞的一种啊,内参就看你的目的条带了,不重合就行
府宅
细菌的内参常选用16S, 16s ribosome就可以
balalaLy
跟细胞差不多,加裂解液或者pbs然后超声,gapdh或者actin
Eason老歌迷
目前我没有做过细菌成分的wb。但是内参的选择都是相通的,内参抗体分为未标记型和标记型,标记物包括生物素、HRP、FITC、PE、Cy染料和Alexa Fluor染料。内参抗体种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Vinculin、Lamin B、PCNA等。你做的细菌成分的,应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。