养点鱼吃火锅
bamboopiggy
1.你的目的蛋白,可能经过修饰了,例如磷酸化,糖基化等。2.胶灌的不匀,runing buffer出问题了。3,转膜的夹子出现问题,转膜没转好,4.如果用胶片,可能时曝光过程中,手移位了。
whilt-shirt
有可能是抗体本身原因,我们实验室经常会。出现这种情况,说明书也不是完全正确
邓豆豆逗
可以先看一下抗体官网的一些效果图,是否做出来有两条带的现象,其次查一下相关文献,看这个蛋白是否有剪切体或一些修饰之类的,还有可能是蛋白降解了,这时候可以找一个阳性对照一起做,如果阳性对照是单条带,就考虑是样本的原因了
txs900416
避免操作问题后,有可能多个原因:1、抗体特异性不好;2、目的蛋白发生了修饰分子量发生了改变
dxywode
bqejjh123
我觉得上边的带肯定是条带,因为你的曝光太强了,如果曝光再弱一些,它就是一条细细的带了,上边的带应该是你的目的蛋白,因为第一过表达蛋白一般会比较强,第二右边的样品里没有上侧条带,下面的带可能是杂带。