单个目的蛋白抗体显影后出现两个条带一般是什么问题？

1.非特异性的分子量偏大条带之一可能是目的蛋白在SDS PAGE出的问题出了问题，另外两个带可能本来就是杂带了。可以回收后对条带用质谱检测精确的分子量加以确定。
2.非特异性的分子量偏大条带至少应该有杂带，杂带出现而且与一抗相互作用，那么只能说杂带的顺序表位也能被一抗识别，必须更换专一性更高的抗体。
3.还有考虑你的镍柱亲和分离的问题，是不是获得了你的需要的目的蛋白质。

有可能是抗体敷育时间过长和特异性不好导致的

• 一般这种情况主要从免疫反应上找原因，有可能是样品的翻译后修饰，如糖基化，这是比较常见的现象，可查阅比较权威的文献， 有时文献上会有相关报道；也有可能是抗体的原因，不过比较少