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电转印是蛋白免疫印迹中最常见的转印方法，即使用电场力驱动蛋白从凝胶中洗脱转移到膜上。此过程中，膜和凝胶放置在一起，并在两个电极之间放置滤纸。在电极之间施加电压，蛋白在电场力的作用下迁移到膜上。
电极之间产生的电场强度（以V / cm为单位测量）是实现转印的驱动力。电压及电极间距都会影响蛋白从凝胶中洗脱的速率。针对不同分子量的蛋白需要进行转印条件优化，以防止转印不足（蛋白不完全从凝胶中转移到膜上），或转印过度（蛋白穿透印迹膜造成损失）。
转膜流程：
1选择转印的方法及设备：可选择传统湿转、半干转或最新的快速半干转 方法。
2准备转印缓冲液及试剂：准备足够的转印缓冲液，用于转印槽以及凝胶、膜的预平衡。
3预平衡凝胶和膜：如有必要，用 转印缓冲液预先平衡凝胶和印迹膜。
4组装凝胶和膜的“三明治”：将凝胶和膜放置在被缓冲液浸湿的滤纸之间，做成转印“三明治”。
5转印过程：将“三明治”放入转印槽，并加入转印缓冲液，选择合适的转印条件，开始转印过程。
转印设备和过程主要有三种：
湿转系统，半干转系统和快速转印系统。
湿转系统
湿转系统适用于大多数各种分子量的常规蛋白转印。转印过程中凝胶和膜被浸入充满转印缓冲液的槽中。
半干转系统
凝胶和膜被夹在预先润湿缓冲液的滤纸之间，滤纸与平板电极直接接触。半干转系统的安装使用比湿转简单。
快速转印系统
快速转印系统是最近发展出来的技术，使用专用设备、专用滤纸及专用缓冲液来快速有效地转印蛋白。通常滤纸和湿润的膜预先放在一次性包装中，简化了转印“三明治”的组装。
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半干法操作要求高，但效率也高。湿法操作要求相对低，花时间多一些。
膜的选择：如果所分离的蛋白需要进行测序，则非 PVDF 膜不可，因为只有 PVDF 膜才能经受住严酷的清洗条件。常用的 western blot 用膜有 NC 膜、 PVDF 膜和尼龙膜
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注意事项
1、转膜条件：
对于分子量10-15kDa的指标转膜时间不宜过长，100V、冰浴45min足矣；对于分子量指标150kDa以上的指标，100V、冰浴2h也足够了；其他介于15-150kDa之间的指标100V、冰浴1h完全可以保证效果。
2、转膜操作：
准备PVDF膜的大小要与切割后的凝胶大小一致或略小，滤纸和海绵大小也要一致；制作“三明治”不能太厚也不能太薄，太厚容易使胶变形，条带弯曲，太薄气泡容易进入，导致条带不完整，这些都可以用增加减少滤纸量来改善；一定要把目的蛋白分子量区域贴在膜的中间部位；分清楚正极与负极，避免反方向转印；转印缓冲液要提前预冷，整个转印过程也需要在冰浴中进行。
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