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求问wb稀释一抗,一般用什么稀释好呢

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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啊哦额欧耶

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10 个回答

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嘉沅十分

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一般TBST就行,可以直接买10X的 回来自己稀释着用

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dxy_j3efh039

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不同的抗体需求不同,可根据说明书要求稀释,有的用TBST,有的则需要用牛奶~

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dxy_y3thrd09

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我们实验室用的5%BSA溶液。

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sing生物狗

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有专门的商业化抗体稀释液,也可以用3%BSA的TBST

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毛桃子啊

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一抗的 TBS 溶液(含 1% BSA)

以使用稀释度为 1:10 的一抗为例。

1 mL 溶液:

​100 µL 一抗

10 mg BSA

900 µL TBS,pH 7.6–7.8

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dxy_a3w222q8

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哈哈哈可能我比较穷,我都是用5%的脱脂奶粉做稀释液(5g奶粉+100ml 1X的TBST漂洗液,摇匀,4℃保存,现配现用)来稀释一抗的,用什么封闭就用什么稀释。

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昆仑茗野

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用过买的一抗稀释液也用过TBST,个人觉得TBST可

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bamboopiggy

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一般用什么封闭液,用什么来配一抗。现在好多公司直接有一抗稀释液直接卖,可以直接买。

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dxy_1bu0xkt0

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如果一抗是GFP,GAPDH这些常见且好用的,可以用1xTBST就好,如果跑出来不好看,背景杂或者条带非特异的,可以用5%脱脂奶粉,再不行就5%BSA。

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小布丁瑶瑶

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wb抗体用5%的脱脂奶粉(1‰TBST溶液)或者1%的BSA(1‰TBST溶液)配置,可以先让抗体与奶粉或BSA蛋白非特异结合,就不会与PVDF膜上的蛋白结合了。

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