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WB的上样质量一般是多少

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_vpsoa34e

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11 个回答

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一支尼可刹米

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通常20-40ug,后期看结果调整

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bamboopiggy

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一般20-40ug就够了,太多了反而不好。

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Gx41

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30-60ug,根据目标蛋白量调节

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dxy_6adps4f2

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一般来说根据之前BCA等方法测定的蛋白质浓度,大约蛋白20μg左右就好了

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whilt-shirt

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一般在30ug左右,根据后期实验结果调整上样量

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丁香一方

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根据你做的蛋白表达量多少选择

总的来说根据你的预实验结果定不要怕尝试,上多少量不要紧关键是能得到漂亮的条带!

一般50-100μg差不多了

DAB显色要50-100μg,用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg,ecl法至少20pg

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balalaLy

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上样量一般是总蛋白20ng左右,表达比较低的蛋白需要上调总蛋白量

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火星人YIWY

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我提的是动物组织里头的蛋白,定量为7.5ug/ul,一般上样6-7ul,上样蛋白量40-50ug

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申东熙老伯

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WB的上样量一般没有明确规定,可以根据蛋白浓度计算上样量,也可以先做预实验,每个孔上样10微升根据趋势再加减。

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府宅

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根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg,ecl法至少20pg。我也用组织作过western,蛋白浓度的确很高。

通常上50-100ug足够了。如果蛋白浓度太高导致上样过小,可用裂解液稀释蛋白使总上样体积在10ul即可

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dxy_gwrp7ndq

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这要根据你做的蛋白表达量多少,一般是用DAB显色要50-100μg,用ecl曝光上样量为20-40μg。

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