Elisa中间接elisa和直接elisa到底是靠什么区别的？

直接法（direct ELISA） 将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。 优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。 缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。 间接法（indirect ELISA） 此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。 优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。 缺点：交互反应发生的机率较高。

主要的区别就是是否使用二抗，只用一抗检测的就是直接标记，使用二抗结合一抗放大检测信号的就是间接标记了

直接Elisa就是目标的抗原抗体的检测形式，间接elisa就是可引入信号放大的形式进行检测；竞争法也是类似～两者都可以进行检测～直接法检测灵敏度低一些～间接法检测背景容易增高～都可以进行检测～看自己目标的含量多少来决定吧

简单的说就是显色方法不同。 间接法是用一抗去标记样本，然后用二抗去标记一抗，通过二抗去显色发光。优势是灵敏 直接法是直接把样本或者一抗生物素化，然后直接加入HRP-SA去显色发光（一个例子，也可能用别的修饰或者别的发光体系）。优势是不需要找抗体对，没有交叉反应，可检测蛋白的范围广

间接ELISA可以提高灵敏度，增大检测浓度范围；直接ELISA要求特异性一定要高，并且检测范围较小。

直接竞争法：包被是抗体，标记的是抗原，酶标抗原与待测样本一同加入，两者一同竞争结合固相抗体，固相抗体结合的酶标抗原与样本中抗原成反比，且两者都在液相中与固相抗体结合的机会一样；间接竞争法：包被的是抗原，标记的是抗体，酶标抗体与待测样本抗原一起加入，固相结合的酶标抗体与样本抗原成反比，且固相抗原与酶标抗体接触机会小，因此固相抗原与待测抗原竞争结合抗体的机会不等，先与液相待测抗原结合；此外，在进行系统放大时，间接竞争法一般加入酶标二抗，二抗可以对抗体多个部位，所以存在放大效应，提高灵敏度，直接竞争法一般无法进行系统放大。

直接Elisa:双抗体夹心测抗原；双抗原夹心测抗体； 间接Elisa:检测抗体常用，利用酶标记的抗抗体检测与固相抗原结合的受检抗体。 直接竞争Elisa:标记抗原，与检测样品中的抗原竞争抗体。 间接竞争Elisa:标记抗体，固相抗原与液相抗原（样品）竞争标记抗体，用于检测小分子抗原。

抗原和抗体的结合方式，直标一抗和二抗标记。直标一抗是直接法，二抗标记是间接法。都能检测抗原。

主要就是间接和直接，直接的一般自己荧光强度就够，所以一个抗体就可以。间接是要连上多个抗体中间是层级放大作用，例如抗原是A，用B抗A抗体，然后再用C抗B抗体

ELISA常分类为4种：直接法、间接法、夹心法、竞争法。 直接ELISA：将抗原固定于固相载体上，用特定于该抗原并且直接偶联到HRP或其他检测分子的抗体检测，即可 测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。 间接ELISA：与直接ELISA测定相似，将抗原固定于固相载体上。但是，检测需要两步过程，通过该过程先将特定 于该抗原的一抗结合到靶标，然后将针对一抗的宿主物种的标记二抗与一抗结合进行检测。 该方法可用于通过用血清代替一抗来检测血清样品中的特定抗体。 夹心法：夹心法（或夹心免疫测定法）是最常用的形式。这种形式需要特定于该抗原的不同表位的两种抗 体。这两种抗体通常被称为抗体对。其中一种抗体包被于固相载体上并用作捕获抗体以促进抗原的固 定。另一种抗体被偶联并促进抗原的检测。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的 抗原结合部位。 竞争ELISA：也被称为抑制ELISA或竞争免疫测定法，这种测定法通过检测信号干扰测量抗原浓度。前面的每一 种形式都适用于竞争形式。样品抗原与参与抗原竞争结合到特定的标记抗体。参考抗原预包被于多孔 板上。将样品用标记抗体预孵育并加入

直接竞争标记抗原，间接竞争标记抗体。理论上都可以检测抗原。

直接elisa是将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量；间接elisa与直接法相似，区别在于一级抗体没有酶标记，需要酶标记的二级抗体识别一级抗体从而定量

反应系统放大时，间接竞争法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位，所以存在放大效应，从而能提高间接法的灵敏度。而直接竞争法一般难以进行放大