登录
搜索
提问
我要登录
｜免费注册
首页
|
实验专题
|
免疫学实验
|
ELISA
ELISA
79 内容 1138 订阅
收藏订阅
实验方法
热门视频
相关问答
推荐阅读
问
自制ELISA板测定的数据前两行异常高
土井挞克树
这种情况最可能的原因就是有杂质蛋白污染，建议先排除污染
3 回答
286 围观
问
elisa实验有哪些步骤需要特别注意的呢？
dxy_gwrp7ndq
1.要注意在包被时：①板孔的选择：ELISA级别的微孔板②抗体选择：选择支持ELISA实验的抗体，根据推荐浓度稀释或摸索最适浓度③包被缓冲液：pH9.6碳酸盐缓冲液或pH7.2磷酸盐缓冲液④包被温度：2-8 ℃过夜包被或室温（37℃）包被2h⑤包被浓度：包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化。一般包被浓度为10ug/ml-20ug/ml。2、注意在封闭时：①包被之后一定要立即封闭（封闭非特异性
3 回答
388 围观
问
Elisa显色相关问题
小布丁瑶瑶
不同试剂盒的组分混用或替代；稀释后的工作液浓度较高，可能是稀释前未离心或者取液量不准确
3 回答
525 围观
问
做ELISA时可以两个板只做一条标准曲线吗？
txs900416
除非两个板的特性完全一模一样，每孔之间操作和间隔时间都相同，不然尽量在两个板上分别作标准曲线
3 回答
514 围观
问
ELISA显色失败都有什么原因？
dxy_gwrp7ndq
失败原因：1.包被原：包括你的包被液有无问题，有没有配错。包被原一般加100微升，37度2小时； 2.封闭：封闭液用的是否适合？你说做了几次都没显色，空白孔也不显吗？如果空白也无颜 色，那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔，也可以满孔封闭 3.一抗：检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应 4.二抗：底物，底物缓冲液……这些都要好好检查！ 5.洗涤：用PBST洗涤，包被和封
4 回答
2204 围观
问
免疫细胞培养的上清液除了用ELISA检测，还听说可以用mRNA检测手法，但是对于上清分泌的细胞因子如何收集，如何处理检测？
lzy必有我师
一般检测上清都是用ELISA方法检测啊，简单实用，结果重复性也还可以，没有必要用什么更高级的方法。培养液浓缩用超滤好了，但是真核细胞表达量比较低，比较麻烦。
5 回答
632 围观
问
ELISA实验如何尽量避免假阴性和假阳性？
dxy_gwrp7ndq
引起 ELISA 测定错误结果的原因主要有：①标本因素（类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等干扰）②试剂因素（标本管中添加物质的影响）③操作因素（标本溶血、标本受细菌污染、标本凝集不全、标本保存不当）
4 回答
713 围观
问
ELISA实验常用的酶有哪几种？
whilt-shirt
ELISA是利用酶催化反应的特性来检测和定量分析免疫反应。常用的酶主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶。
1 回答
739 围观
问
Elisa标曲问题
西柚味的芋圆
你看一下试剂盒推荐用哪个拟合方式，不同的试剂盒会不同。可以直线，可以曲线的
9 回答
480 围观
问
Elisa数据负值怎么才能做出正的来？
西柚味的芋圆
blank孔是否污染了吧 样本是否浓度是否在曲线范围之内3 、板子是否脏？导致孔与孔之间不一致
8 回答
398 围观
问
ELISA抗原包被问题
西柚味的芋圆
4度过夜(指12h)包被效果不太好. 包被抗原浓度不确定,没定量,可能你的蛋白量太少(最有可能) 没有封闭的步骤 一抗稀释倍数不清 你的洗涤影响不会很大,一般没问题.
8 回答
3027 围观
问
怎么定阴性对照？及阳性cut-off值呢？
CXCR3
阴性对照可以是空白的对照，不加样品。阳性对照在没有样本的情况下我们会根据说明书的的结果。
9 回答
670 围观
问
请问elisa实验中，空白、阳性对照、阴性对照均显色，可能是什么原因？
西柚味的芋圆
那肯定是你洗板子没有洗干净。或者你在加样的过程中导致标准品漏了
6 回答
401 围观
问
实验OD值偏差问题，想知道哪里出错误了
颜渊溪桥
首先前提是标准曲线做的没有问题，那么第二次的样品需要稀释后检测呢，是否样品中的本来前胶原含量就比较多。
9 回答
302 围观
问
多组实验下想根据OD值计算样本浓度，应该如何计算？
莹啊免疫啊
按每组的算，每组都可能会有不同阴阳对照的值，不能完全统一
10 回答
419 围观
问
Elisa中间接elisa和直接elisa到底是靠什么区别的？
西柚味的芋圆
直接法（direct ELISA） 将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。 优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。 缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。 间接法（indirect ELISA） 此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量
13 回答
1608 围观
问
石蜡切片的免疫组化，抗体只标明可做免疫印记,免疫荧光，是否可以做免疫酶技术?
西柚味的芋圆
Elisa应该是不行的，一般做wb的抗体我有尝试去做荧光和组化可以勉强做出来。但是很少很少可以用来做elisa
10 回答
280 围观
问
ELISA的样品稀释2000倍，这么大的稀释倍数是否要导致结果不准确？
颜渊溪桥
建议按梯度倍数稀释样品，对照标准曲线，只要不超过标曲范围，检测结果是可信的。
11 回答
656 围观
问
将酶免疫技术中的间接法改为一步法合理么？
peaceful13
可以的～主要是一步法的检测灵敏度会比较低，
8 回答
546 围观
问
请问elisa实验中，空白、阳性对照、阴性对照均显色，可能是什么原因？
sfnana
您好，楼主，请问你的问题解决了吗？我现在也是出现了跟你一样的问题，阴性，空白值都很高。（我做的是双抗体夹心，biotin标记的抗体 1：1000 100uL/孔，亲和素1：5000） 样本 （O.D.450 nm） 阴性 （O.D.450 nm） 空白（O.D.450 nm） 2.5310
6 回答
1669 围观
1
2
跳至
页
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序
