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使用trizol法提取秀丽隐杆线虫的总RNA,线虫老是裂解不充分,呈现为一条线,想请教一下大家都是怎么裂解的?

相关实验:RNA提取及检测

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努力搬砖的小凡


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4 个回答

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whilt-shirt

有帮助

可以考虑使用高通量组织研磨器匀浆后提前RNA

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dxyc42u

有帮助

可以先把线虫样本搅碎在加入trizol

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土井挞克树

有帮助

把ph增大,碱性环境下裂解时间长一些。

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loveliufudan

有帮助

秀丽隐杆线虫的裂解比较困难,需要使用一些特殊的方法来充分裂解线虫。以下是一些常用的方法,供您参考:

液氮裂解法:将秀丽隐杆线虫样品迅速置于液氮中,使其迅速冻结,然后使用研钵和研钉在液氮中研磨线虫样品,使其充分裂解。

碱裂解法:使用NaOH或KOH等碱性试剂将线虫样品裂解,然后中和溶液,可充分裂解线虫。

切碎法:将秀丽隐杆线虫样品用刀片切碎,然后用试管摇床或超声波震荡器振荡裂解。

冻融裂解法:将线虫样品冻结后快速回温,重复数次,使其充分裂解。

热澡法:将线虫样品置于水浴中,用高温热澡的方法裂解线虫。

以上方法可以根据实验室条件和个人经验进行选择和优化。同时,也要注意线虫样品的处理和保存条件,以保证RNA的质量和完整性。

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