juyue2010
miRNA结合的是调控序列,构建cds区作用不大
loveliufudan
miRNA与基因CDS区的结合可以通过一些实验方法进行验证。将CDS区构建到双荧光载体上验证可以是其中的一种方法,但具体的验证方法需要根据您的实验目的和研究问题来确定。
一般来说,miRNA与CDS区的结合可以通过RNA干扰(RNAi)实验进行验证。在RNAi实验中,利用RNA干扰技术将miRNA转染到细胞中,使其结合到目标基因的CDS区,从而抑制目标基因的表达。为了验证miRNA是否确实结合到了目标基因的CDS区,可以进行一些进一步的实验,如RT-qPCR、Western blotting、双荧光报告基因实验等。其中,双荧光报告基因实验可以通过构建带有miRNA结合位点的CDS区到双荧光载体上,并将该载体转染到细胞中,来验证miRNA是否能够识别和结合到CDS区。
需要注意的是,miRNA与基因的结合并不仅仅局限于CDS区,它们也可以结合到3'UTR等其他区域。因此,在进行验证实验时,需要根据具体情况选择合适的方法和区域来进行实验。
huarenqiang5
可以把cds区构建到双荧光载体上验证。
秋秋欣欣
可以的 ,可以用双荧光素酶检测。
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