RNA干扰技术有什么缺点

RNA 干扰（RNA interference，RNAi）技术利用双链RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA从而阻断靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型，是进行分子机制实验中最常用的实验技术。

目前，RNA干扰方式主要集中在两方面：化学合成的siRNAs和Vector-based shRNA。

对于siRNA，其通常直接使用化学合成并转染细胞，缺点是稳定性较低，作用时间也较短；

对于shRNA，其有两种导入细胞的方式，一种是通过构建质粒载体，一种是通过病毒转染，相对操作更复杂，但作用时间更长。

在PCR制备编码 shRNA的转录DNAs方面

缺点: 这种dsDNA导入细胞有一定难度。

在shRNA表达质粒方面：

缺点: 制备耗时; 导入效率较低下; 还涉及质粒在细胞内的定位,shRNA 体内折叠效率, 非特异性基因抑制等。

(1)化学合成dsRNA:

缺点: 价格高、 定制周期长。

(2)体外转录dsRNA:

缺点: 操作困难、 耗时。

(3)PCR制备编码 shRNA的转录DNAs:

缺点: 这种dsDNA导入细胞有一定难度。

主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的