【求助】提组织RNA时，为何OD值总是小于1.8

RNA 260/280<1.8说明有蛋白质、酚的污染。

1，有污染，从新提取，从各方面注意。

2 我以前也遇到过比值很低的情况，其实是我们的仪器不太准，如果这样的话，低了也能用

可能有以下原因:

1.匀浆时，样本太多，而抽提液使用量太小

2.匀浆后，样本没有静置

3.水相中可能有酚残留

4.RNA沉淀溶解不充分

5.测比值时，RNA溶解在DEPC水中，低的离子浓度和PH值增加了280nm的吸光值

用TE稀释，用TE调0

谢谢各位的指点。

会不会是TRIZOL的问题了？

组织能否完全研磨成匀浆是否也与比值有关？我的组织较硬，研杵研不碎，剪刀也不能完全剪成匀浆，所以每次总有一些微小的块状物。这是否会影响所提取RNA的质量了？

当然会有影响了，没有完全研磨成粉末状，与trizol反应时怎么能接触完全呢？必然导致块状物里的RNAse起作用。还是用液氮吧，我以前做的是海参的肌腱，不光硬而且还很韧，但是用液氮一冻就变得特别脆，用研钵可以完全研磨成粉末状了，趁液氮还没挥发完毕就转移到trizol里取得了很好的质量。

把异丙醇加大用量，再用乙醇多洗几次再看看。组织中RNA的量是多但是杂质也多。你可以试试！我们试过了很管用。

如果260/280小于1.8是蛋白质污染了，以后吸上面的液体时，离中间的小白片远点。260/230小于1.8，是有机溶剂污染，你酒精没有晾干，再多晾一会。

可能有以下原因:
1.匀浆时，样本太多，而抽提液使用量太小
2.匀浆后，样本没有静置
3.水相中可能有酚残留
4.RNA沉淀溶解不充分
5.测比值时，RNA溶解在DEPC水中，低的离子浓度和PH值增加了280nm的吸光值

一般来讲如果使用DEPC处理水会使OD值小于1.8，可以换TE缓冲液。

如果使用TE缓冲液效果没有改善，有可能是有蛋白的污染。

od值比较不仅与降解有关,也与RNA纯度有关,一般值比较低,说明不纯,有蛋白质污染,较高,则可能是有降解;另用DEPC水溶解也能使od值偏低