小片段RNA干扰致基因表达沉默的具体步骤有哪些？

1，制备sirna，有化学合成法和转录法，其中还涉及shrna和Ago蛋白

2，转染宿主细胞

3，检测靶基因是否沉默

步骤一 确定干扰基因，设计并合成合适的小干扰RNA（片段型或载体型小干扰RNA）。

步骤二 预转染实验，进行细胞培养，摸索转染条件、时间并进行必要的检测（WB，PCR 等），确定干预效果最佳的一对小RNA。

步骤三 正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。

步骤四 转染后检测，根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

1.设计小rna，订购小rna

2.转染细胞

3收样，检测基因是否沉默