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想要通过荧光定量pcr来检测粪便,组织中的细菌的量,可以用DNA做吗?需要内参吗?如果不需要为什么不需要?怎么做数据处理

相关实验:定量PCR技术

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dxy_f9t8ng19


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2 个回答

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loveliufudan

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可以使用荧光定量PCR来检测粪便、组织中的细菌量,而DNA是进行PCR的重要基础。

通常情况下,荧光定量PCR需要使用内参来校正PCR反应的变化,以确保可靠的定量。内参通常是一个稳定的基因,在样本中的表达量相对稳定,且与待检测的靶基因有相似的扩增效率。使用内参可以帮助纠正PCR反应的波动,使得PCR反应更加准确可靠。

然而,在一些特殊情况下,如粪便等样本中可能存在许多抑制性物质,这些物质可能会干扰PCR反应。在这种情况下,可以使用外部标准曲线来校正PCR反应。外部标准曲线是一组已知浓度的DNA标准,通过测量标准曲线上的荧光信号,可以建立标准曲线,进而计算出待检测样本中的靶基因浓度。外部标准曲线不需要内参,因为它已经在建立标准曲线的过程中考虑了PCR反应的变化。

在数据处理方面,可以使用PCR分析软件进行数据分析和结果解读。PCR分析软件可以通过对荧光信号进行分析,计算出每个样本中靶基因的浓度,并生成结果报告。需要注意的是,在数据分析之前,需要对荧光信号进行背景校正和阈值设置,以确保结果的准确性和可靠性。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

我认为是需要的,做PCR就要做内参,否则做出的结果说服力差,不可靠,可以用DNA做。

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