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天一湖医者
根据荧光定量PCR仪荧光通道，选择适配的荧光基团，优先选择常用的荧光基团，如FAM、VIC或CY5等；
2. 根据荧光基团类型选择淬灭基团。早期的淬灭基团TAMRA，自身会发出荧光信号，干扰检测结果，后续慢慢地被其他淬灭基团替代。目前淬灭基团最常用的就是BHQ、NFQ-MGB或QSY等；
3. 进行多重qPCR检测时，每个通道要选择不同的荧光基团，且避免各标记基团的激发和发射波长重叠，出现荧光干扰的情况
汤姆卜丽波
选择报告基团时⾸先要确认激发波长和发射波长与仪器是匹配的。例如在我们的StepOne仪器上就不能够使⽤第三通道的荧光染料如NED, TAMRA等。对于多重荧光反应，标记不同探针的报告基团染料的最⼤发射波长应该⾄少有15nm的差异
对于淬灭基团，必须要保证其吸收光谱与报告基团的发射光谱有重合。例如第⼀代双标探针，使⽤TAMRA作为淬灭基团（吸收波长558nm），可以淬灭FAM（发射波长517nm）和VIC（发射波长552nm）。但是由于TAMRA有⾃⼰的发射荧光（577nm），从⽽会增加背景荧光信号，同时还要占⽤⼀个荧光通道，减少了仪器的检测通道，因此，TAMRA探针现在使⽤的已经⽐较少了。⽽⽬前使⽤最为⼴泛的是诸如MGB-NFQ，QSY等⽆荧光的淬灭基团，它们吸收报告基团所发出的荧光之后，会以热量形式将能量散发出去，⽽不是以荧光的形式散发，所以背景信号很低，可以达到更⾼的检测灵敏度。
未来9
荧光基团的选择原则
由于目前不同荧光定量PCR仪的原理和提供的检测光光谱范围的差异，因此在选择探针的发光基团和淬灭基团时一定要根据所用的仪器型号设置的可检测的荧光信号范围内选择（探针法可连接我们的荧光定量PCR试剂盒的编号及对应的机器型号）
- 常与5’端相结合的荧光报告基团：
FAM（6-羧基荧光素）
TET（四氯-6-羧基荧光素）
JOE（2，7-二甲基-4，5-二氯-6-羧基荧光素）
HEX（六氯-6-甲基荧光素）或VIC -
常与3’端相结合的荧光淬灭基团：
TAMRA(6-羧基四甲基若丹明)
DABCYL（4-（4-恶烷氨基苯偶氮）苯甲酸）
BHQ
不是。对于5通道的机器来说，你的发光基团就要与5个的滤光片对应，分别在这5个滤光片的波长范围内选择标记。淬灭基团主要是接收发射基团的光，所以波长通常要比发光基团长一些，也就是每个染料都有自己相对应的淬灭基团。
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