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设计引物时需要清楚哪里是内含子和外显子吗?

相关实验:PCR 引物设计及评价实验

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啊啊哈哈哈1

根据DNA设计引物时,想到其中的内含子在后面的加工中会被去除,那如果引物序列恰好在内含子中见,岂不是会设计失败?

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

如果引物的序列恰好在内含子中,可能会导致PCR扩增失败或者扩增出错误的产物。在设计引物时,应该尽量避免选择内含子区域作为引物的靶标,以减少这种情况的发生。

在设计引物时,可以考虑使用已知的外显子序列来设计引物,或者使用计算机软件对基因组进行分析,筛选出不包含内含子的序列作为引物靶标。此外,还可以利用特殊的引物设计技术,如外显子特异性引物设计技术(Exon-primed intron-crossing,EPIC技术),在跨越内含子的同时能够引导PCR扩增特定的外显子区域。

需要注意的是,在引物的设计过程中,还需要考虑引物的特异性、互补性、长度等因素,以确保能够扩增出目标基因的特定区域,并且避免引物的交叉反应和非特异性扩增。

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啊啊哈哈哈1user-title

感谢您的回答,那如何知道一段DNA序列的内含子位置呢?

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z流沙z

有帮助

是的,如果以DNA为模板设计引物,要注意内含子和外显子

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土井挞克树

有帮助

需要的,不可以包含太多的内含子和外显子,不燃引物设计容易失败

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