用质粒做qPCR的时候，低浓度的不同稀释倍数质粒（1undefined4-1undefined1copies/ul）CT值结果很接近，是质粒稀释的问题吗？要

考虑质粒本身浓度太低，所以稀释后ct值拉不开，很接近。

根据您提供的信息，释放的质粒浓度为10^4-10^1 copies/ul，但是CT值结果很接近。这种情况下，CT值结果接近的原因可能有多种可能，其中质粒稀释可能是其中之一。

质粒稀释是常见的PCR反应问题之一，质粒稀释不均匀或过于稀释可能会导致PCR反应结果不准确。因此，为了获得准确的结果，应当确保质粒稀释均匀并且浓度适当。建议您重新检查质粒的浓度和稀释倍数，确保样品的合适稀释倍数和质量。此外，还需要检查PCR反应条件和反应体系，以确定是否存在其他因素影响PCR反应结果。

总的来说，CT值接近可能是多种因素的结果，您需要仔细检查所有实验步骤和条件，以确定原因并解决问题。

首先要明确一下是否能以质粒来做qPCR，一般是以cDNA为模板，其次如果是质粒的话，可以多稀释几个梯度

这个范围的质粒浓度已经偏低，尤其10～3次方以下的浓度，本身ct值更大了，加样误差会更明显，可以尽量选择总体积＞30ul的大体系的连续稀释法，充分混匀，另外可以选择专门用于稀释质粒的试剂进行稀释减少吸附等误差，以及要做复孔。另外 要关注NTC孔是否也有扩增，如果有，也会影响低浓度质粒的曲线ct值接近，不成梯度。