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内参相差1个ct值的结果可以用吗?内参相差多少的结果可以用?如果内参差别比较大样品要如何处理呢?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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实验室小助理夏奇

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4 个回答

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土井挞克树

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差一个ct值是可以用的,如果差的大就需要重新稀释cdna

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loveliufudan

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通常来说,内参之间的差异应该在1个CT值以内,这是比较接受的范围。如果内参差异比较大,会对结果的准确性产生影响。此时需要评估内参的稳定性,选择合适的内参进行数据分析,或者使用多个内参进行数据分析。

如果内参之间的差异比较大,可以采用以下方法进行处理:

选择更稳定的内参:通过分析多个潜在内参基因的表达稳定性,选出相对稳定的内参进行数据分析。

根据内参的差异进行标准化:如果需要比较不同样品之间的相对表达水平,可以将内参的差异考虑进去,进行标准化计算。比如,可以计算相对表达水平,即目标基因的表达量除以内参的表达量,并将结果归一化到一个标准样品的表达水平。

使用多个内参:使用多个内参进行数据分析可以减少内参的差异对结果的影响。

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z流沙z

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内参有差别问题不大,因为都是计算的一个相对值,要想比较一致的话,逆转录的RNA量和稀释比例一样就行

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伯乐生命医学产品

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内参如果是稳定表达的,那么它反映的是起始的细胞的量,当然也与提取效率相关。因此对于内参没有严格的标准说相差几个ct之内就能用。但如果差别比较大(>4个循环),那么说明起始的细胞量差别较大或者提取操作的平行性不好,需要检查并加以排除。

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