做qPCR时阴性对照水中一直有扩增子是怎么回事

考虑气溶胶污染，使用带滤芯枪头，换个房间加样

把阴性对照重新换掉，有扩增说明有污染

有几种可能的原因：

污染：可能存在污染，即DNA或RNA在实验室环境中存在，进入了试剂或反应体系中。这种情况可能是由于实验室的DNA或RNA污染引起的，或者可能是由于PCR试剂或其他反应组分中存在的污染引起的。在这种情况下，应该检查实验室中所有试剂和反应组分，以查找可能的污染源。

假阳性：假阳性是指在PCR反应中出现了扩增信号，但实际上并不存在目标分子。这种情况可能是由于反应物的特异性问题引起的。在这种情况下，可以尝试优化PCR反应条件，例如调整温度梯度或改变引物浓度等，以提高反应的特异性。

目标序列存在于样本中：阴性对照通常是使用无模板的水或缓冲液进行反应。然而，如果样品中存在目标序列，那么它可能会在反应中扩增。在这种情况下，可以检查阴性对照水和样品中是否存在相同的序列。如果是这种情况，可以考虑使用另一个阴性对照，或者使用更特异的引物来避免这种情况。

考虑以下几点原因：

1.反应体系组分（如，水）被污染；

2.标本间的交叉污染或产物污染；

3.使用的枪头未带滤芯；

4.引物二聚体的出现。

可能存在以下情况:反应体系组分（如，水）被污染，标本间的交叉污染或产物污染，使用带滤芯的枪头；引物二聚体的出现。