曙光karry
1.切记产物不要在实验区打开
2实验区每天要酒精消毒,紫外杀菌,且实验室要多通风
3有条件的话,加模板不要每次在同一个超净台操作
juyue2010
引物进行分装,使用含UDG酶的qPCR酶
huarenqiang5
首先要辨别PCR污染的来源。然后针对性给予相关措施。
在排除试剂污染的可能性外,更换试剂后,若不久又发现试剂被污染了,则考虑可能为环境污染。环境污染的最主要原因是DNA溶液的溅出和DNA气溶胶造成的实验区域的污染,这尤其在PCR产物扩增区容易出现。移液器枪头和EP管架是也较常见的污染部位。
如果是环境污染,还可对每个区域进行涂抹采样和核酸提取,以最终鉴定污染的区域所在。
对PCR的环境污染,有如下几种治理方法:
1. 用常规消毒液定期在环境中喷雾消毒处理。
2. 稀酸处理法:对可疑器具用1mol/L盐酸擦拭或浸泡,使残余DNA脱嘌呤;其缺点是盐酸对皮肤有一定的腐蚀性。
3. 紫外照射法:紫外波长一般选择254/300nm,照射30分钟至2小时。但需要注意的是,UV照射仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大。
4. 选用商品化的DNA污染祛除剂。
对于PCR反应液的污染,可采取以下方法:
1. DNase I 法
2. 内切酶法
3. 紫外照射法
4. 尿嘧啶糖苷酶(UNG)法:
总之,灵敏度越高的PCR反应越容易出现PCR污染。采用适当的措施消除污染,可以避免重复实验和浪费试剂,也使得实验结果更加可靠而。
天一湖医者
传统的紫外线,酒精擦拭,84消毒液都有一定的功效!
bamboopiggy
找一个带去除基因组dna的反转录试剂盒,应该就可以了
毛利小五郎的徒弟
在PCR实验前用70% 乙醇擦拭工作台
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