qPCR实验内参基因CT值问题？

太大了，提rna的时候看下你的纯度，是不是有些污染；或者是引物不对，换引物试试

内参一般15-20之间比较可信。

是，内参一般15-25之间比较合适。你这个太大了

是有点高，一般建议15-25之间。

gapdh一般在15左右，20几都不可信了

一般理想的内参就会有这样几个条件，表达量较大；稳定表达于不同类型的细胞和组织；表达水平与细胞周期以及细胞是否活化无关；不受任何内源性或外源性因素的影响；不存在假基因，以避免基因组 DNA 的污染扩增。一般用的是b actin，gapdh，18srna。我感觉你这个确实不合适

是有点高，这么高的内参值你的目的基因是多少？有可能是你的模板有降解

可能原因：

1，内参引物效果不佳：可能原因是引物设计存在问题，比如存在引物二聚体等；另外，也有可能是引物使用时间过久或者保存不当，出现了降解。

2，RNA质量不好，比如260/280, 260/230值偏低；

3，反转时RNA含量过低；我们反转20uL体系一般用1ug RNA；

4，定量时cDNA以及引物含量偏低；

是的，太高了，一般15-20合适