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求助,内参基因(gapdh)CT值在15-18,目的基因的CT值比内参基因小大概14-16,这个引物还能用吗,还是怎么处理解决

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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中二少女不熬夜

cDNA已经稀释10倍

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8 个回答

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dxy_37qs094

有帮助

出入不大可以用。如果出入很大,说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了管家基因是用来定量的。

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晨路阳光

有帮助

这个引物是可以用的,因为内参基因CT值在15-18范围内是正常的,沒有规定说目的基因的CT值一定要大于内参基因CT值

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dxy_3xid5eh3

有帮助

可以用,内参并不一定表达量高。可查询相关组织或细胞相关文献,看用该内参是否合理。检测q PCR引物是否可用主要看该引物的溶解曲线是否sharp,是否有杂峰等

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李亚彪111

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可以用,总共跑了多少个循环?另外,看看溶解曲线

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dxy_sbw2taor

有帮助

内参基因说是稳定表达 理论上这个是没问题的可以用

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清清冷风

有帮助

我觉得应该是能用的,目前好像没有文献对这方面有硬性规定。

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huarenqiang5

有帮助

可以用,正常来说内参基因的CT15-25之间是比较靠谱的。 你也可以考虑提高一下模板上样量再跑一下内参看看。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可以用,因为没有规定说目的基因一定要大于内参基因,内参基因只能说是稳定表达

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