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qPCR标曲低浓度曲线分不开,模板超声没用

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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dxy_tx0rbbk2

超声时间拉了梯度,还是不能区分开标曲后两个梯度。是要更换引物探针了吗?此次引物探针设计的是基因组中重复数量特别高的片段,会不会有这个原因。

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3 个回答

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土井挞克树

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建议更换引物探针,高重复性容易导致曲线不明显

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有没有考虑过污染的问题?浓度梯度分曲线分不开可能因为稀释的问题,背景值高很有可能是染料污染或核酸污染

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juyue2010

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引物特异性性不够,建议更换引物

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dxy_tx0rbbk2user-title

目前也在考虑此问题,选取的位点是卫星DNA,拷贝数过多也可能有问题

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