dxy_gyhgh377
求求,拜托了。
我之前RNA浓度算好了,把他们在反转录的时候弄成了一个浓度的。会不会是因为RNA质量不好?因为我电泳的时候条带弥散了
凌晨三点Dxy
常见原因:①排枪与枪头不匹配,结合不严密,导致加样量不足/不均一;②使用排枪吸取内标混合液时,液体堵住了部分枪头滤芯,导致向裂解板加样时加样量不均一,甚至部分孔没有液体加入。
解决方案:建议使用配套量程的枪头,移液器要慢放慢吸;分装试剂和加样时仔细观察液体是否打出。
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内参不齐是因为上样的cDNA浓度不一样所致,要想齐,逆转录之前测浓度要准
Eason老歌迷
差异是可以有的,但是如果差太多就不行了!你可以在提完rna,立即测一下浓度,看看是不是降解了。另外是否电泳检测过rna的完整性?可能的原因:1.RNA浓度测不准确2.样品降解3.你实验本身对内参的表达有干扰。
府宅
1.RNA浓度测不准确
2.样品降解
3.你实验本身对内参的表达有干扰