丁香实验_LOGO
登录
热门搜索
rat igg (h小鼠wbhuman igg (hrabbit igg (h熔解曲线探针法katchem硼化学(castranswellgoat anti-mouse igg (hgoat anti-rabbit igg (h
提问
我要登录
|免费注册

Qpcr扩增内参和指标的CT值相差太多怎么办?内参Ct是13,指标Ct是30

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

user-title

飞来1988

wx-share
分享

3 个回答

user-title

Eason老歌迷

有帮助

相差太大的话,你重新p一次吧,Ct值的范围为15-35。Ct值小于15,认为扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值。理想情况下,Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系,也就是标准曲线。通过标准曲线,扩增效率为100%时,计算出基因单个拷贝数定量的Ct值在35左右,若大于35,理论上模板起始拷贝数小于1,可认为无意义。

user-title

天一湖医者

有帮助

不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值)就不完全可靠,但至少可以说明目标基因表达非常低.

user-title

balalaLy

有帮助

指标CT值高说明表达量低,很正常,如果你觉得内参CT太低,也可以换一种内参

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序