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为什么引物的3'端不能进行任何修饰,也不能有形成任何二级结构的可能,3'端碱基尽量不选用T?

相关实验:定量PCR技术

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3 个回答

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迟C迟

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因为引物的延伸是从3′端开始的,3不要终止于密码子的第3位,尽量不要用T,因为密码子第3位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率。

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天一湖医者

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因为PCR反应中是从引物的3‘端开始合成新DNA链的。所以新合成的DNA链中,原来的引物在5‘端,新加入的碱基在3‘端。

引物3’端为关键碱基,是PCR延伸的起始端,不能进行任何修饰,也不能形成二级结构的可能,一般3‘端也不能发生错配,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

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秋秋欣欣

有帮助

因为引物的延伸是从 3’ 端开始的

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