RACE(3’端 和 5‘端-RACE)实验技术
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一、RACE概述
RACE(rapid-amplification of cDNA ends,RACE) 即cDNA末端快速扩增技术,是基于PCR技术,由一段cDNA已知片段,通过往两端延伸扩增从而获得完整cDNA的5'和3’末端的有效方法, 由于RACE具有简单、快速、廉价等优势,使其在cDNA文库的构建及筛选,新基因的发现等方面得到了广泛的应用。
二、RACE原理及技术服务流程
3'-RACE的技术服务流程
利用连有通用接头的引物3-CDS作为引物反转录mRNA,形成cDNA链,然后以cDNA为模板,基因特异引物GSP2(gene specific primer 2,GSP2)和通用引物Long up进行第一轮PCR,再用目的基因特性引物GSP2和通用引物Short up扩增目的基因的3' 末端。