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qPCR的内参应该怎么选

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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念冬寒

有时候实验条件会影响内参表达,只能去查找相关文献吗

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4 个回答

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bamboopiggy

有帮助

先选你们实验室常用的内参,在你cdna浓度差不多的情况下,如果内参相差很大,就要考虑换内参,这个只能自己试

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汤姆卜丽波

有帮助

内参主要的作用就是校正和标准化,

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天一湖医者

有帮助

在选择内参时,可以通过geNorm、BestKeeper、NormFinder、RefGenes 等工具来评估,这是保证结果可靠准确的前提。

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Eason老歌迷

有帮助

内参基因在不同组织的所有样本中应具有相对稳定的表达水平。内参基因通常是各种管家基因,例如ATCB、GAPDH、β-actin、18S rRNA等。它们的表达水平受环境因素影响较小,并且可以在生物体几乎全部组织及各个生长阶段持续表达。在不同的组织中,管家基因mRNA的含量都很丰富。理想的内参基因应该满足以下条件:1.不存在假基因(Pseudogene),以避免基因DNA的扩增;2.高度或中度表达,排除低表达;3.稳定表达于不同类型的细胞和组织(如正常细胞和癌细胞),而且其表达量是近似的,无显著性差别;4.表达水平与细胞周期及是否活化无关;5.其稳定的表达水平与目标基因相似;6.不受任何内源性或外源性因素的影响,如不受任何实验处理措施的影响。

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