bamboopiggy
可能产物不特异,出现多条带,但是片状弥散,可以考虑灌胶不匀,尤其是在胶中直接加入EB或GV的情况下
天一湖医者
可能是非特异性扩增多,即出现非特异性扩增带。也就是:PCR 扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异 性扩增带。 非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。 二是 Mg2+离子浓度不合适(有些帖子一味的说 Mg2+离子浓度过高会引起非特异性扩 增,这是问题的一个方面,Mg2+离子浓度过低也同样会引起非特异性扩增)、退火温度 过低,及 PCR 循环次数 过多有关(过多循环一般是超过 25 次循环)。其次是酶的质和 量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现,酶量过多有时也会出 现非特异性扩增。
Eason老歌迷
可能有以下原因导致,你的酶量过高,降低一点。你的dNTP浓度过高。你的MgCl2浓度过高。或者是你设置的循环次数过多。也有可能是退火温度过低。或者是你的电泳体系有问题。