引物长度一般在15-30bp。常用的为18-27bp。引物GC含量一般为40%-60%， 45-55%为宜。引物所对应的模板序列的Tm值在55-80℃之间。可以用ncbi查，然后用Primer Premier设计

你可以看看这篇文献https://genome.cshlp.org/content/7/5/541

Sequence Mapping by Electronic PCR

分型这个方面做的不多。你可以参考一下这个

https://zhuanlan.zhihu.com/p/509504283

建议从

pcr mapping基因的图谱中进行一个总体分析