多重 PCR 扩增实验

一、材料1. 酶和酶缓冲液Taq 聚合酶许多 Taq 聚合酶都可以用；作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多数需要. 如果需要提高PCR 产物的特异性，应该使用热启动聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附带的缓冲液。2. 核酸和寡核苷酸（1）溶于水的 DNA如果 DNA 在 TE 中，应该在 PCR 反应混合物中添加 MgCl2。如果用从石蜡包埋的组织中纯化的DNA 做模板，选择的

多重 PCR 的基本过程可分为如下几步：（一）选择目标基因由于多重 PCR 在同一个反应体系中需要加入多对引物。同时，扩增区域的选择必须符合分析的目的，如通常对于致病微生物，需要选择其保守序列，如 16SRNA，或者毒力基因、毒力相关基因，以防止检测到非致病突变体而无法解释结果；对于需要分型的对象来说，需要选择它们之间有差异的保守序列进行扩增；对于高度同源的序列来说，可以用相同的引物进行扩增，但获