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3 个回答
微暖
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引物设计:第一条片段的反向引物包含第二条片段的25bp左右，第二条片段的正向引物包含第一条片段的25bp，引物长度大概50多bp。
分别扩增两条片段。
以这两条片段为模板，第一条片段的正向引物和第二条片段的反向引物，pcr扩增就好了。
天一湖医者
有帮助
首先怀疑,特异性不好,解决办法:
1.
可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍;
2.
适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环
bamboopiggy
有帮助
一开始分别pcr的时候有条带吗？如果这个时候就没有，那下面一步就没必要做了，首先考虑引物设计问题，确定你的引物对
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