换新的一管酶，做实时荧光定量复合扩增的HRM曲线总是发现内参跑的不好，峰很低是怎么回事？

是不是你内参的引物用的时间比较久坏了？

1、引物设计不佳：避免二聚体和发夹结构的出现；2、引物浓度不佳：适当调整引物浓度；3、退火温度低：提高退火温度；4、镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度；5、模板中有基因组的污染：通过引物设计避免非特异扩增。

可能是你的引物特异性比较差，存在大小相近的非特异性产物，可以利用高分辨率琼脂糖电泳确认

有很多种原因，比如说引物设计不好，引物浓度不够，退火温度低，镁离子浓度过高等