PCR 扩增的体系条件应该怎么摸？一般要先从哪项开始？为什么进行复合扩增体系条件就要重新摸？

如果你不想摸条件的话，可以在你正式pcr cycle前加一个touch down的程序，这样基本都可以跑出条带来。

　　PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。