PCR实验结果，无内标基因的扩增曲线是与采样操作、核酸提取有关吗？

大草原的小灰驴

2022-04-19

新冠核酸检测的咽拭子标本，保存在-20摄氏度以下不超过两个小时。

采用硕世的RNA 提取试剂，全自动核酸提取仪操作。

新冠核酸检测试剂有多种品牌的，达安、伯杰的按照开盒时间和试剂盒有效期顺序使用。但是都会出现或多或少内标基因没有扩增曲线的问题。

麻烦请问大家这通常是哪个环节的问题？更换检测试剂的厂家盲目复查是否有意义呢？与采样操作的关系大吗？先谢谢啦！

府宅

2022-04-20

有帮助

内部无扩增但靶序列有扩增有可能是细胞本来就没有此内部基因，也有可能是本身模板就没提出来，然而在PCR过程中被污染，使得靶基因被扩增出来了。

dxy_gwrp7ndq

2022-04-20

有帮助

内标与靶基因无扩增说明模板有问题，需要重新提取模板。

Topmicro

2022-04-20

有帮助

建议你设置阳性对照，更换检测试剂的厂家盲目复查没有意义，与采样操作有很大关系，如果模板太少内标基因确实有不起峰的情况。

bamboopiggy

2022-04-20

有帮助

这个你最好弄个阳参吧，要不也不知道是试剂问题，操作问题，还是样本量太少的问题