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PCR实验结果,无内标基因的扩增曲线是与采样操作、核酸提取有关吗?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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大草原的小灰驴

新冠核酸检测的咽拭子标本,保存在-20摄氏度以下不超过两个小时。

采用硕世的RNA 提取试剂,全自动核酸提取仪操作。

新冠核酸检测试剂有多种品牌的,达安、伯杰的按照开盒时间和试剂盒有效期顺序使用。但是都会出现或多或少内标基因没有扩增曲线的问题。

麻烦请问大家这通常是哪个环节的问题?更换检测试剂的厂家盲目复查是否有意义呢?与采样操作的关系大吗?先谢谢啦!

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4 个回答

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府宅

有帮助

内部无扩增但靶序列有扩增有可能是细胞本来就没有此内部基因,也有可能是本身模板就没提出来,然而在PCR过程中被污染,使得靶基因被扩增出来了。

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

内标与靶基因无扩增说明模板有问题,需要重新提取模板。

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Topmicro

有帮助

建议你设置阳性对照,更换检测试剂的厂家盲目复查没有意义,与采样操作有很大关系,如果模板太少内标基因确实有不起峰的情况。

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bamboopiggy

有帮助

这个你最好弄个阳参吧,要不也不知道是试剂问题,操作问题,还是样本量太少的问题

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