ELISA、WB、Q-PCR采样及取样注意事项

一、血清提取方法：

1.全血促凝管取血，轻轻颠倒两三次，放置片刻让全血凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。

2.全血普通EP管取血，室温放置2h左右，让其凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。

特别注意：取血清避免震荡，以防止溶血，溶血会对结果有影响。

二、样本取量及运输

每个指标做单孔检测，一个样本需取血清30ul，3个复孔需90 ul，冰盒-20度中短时运输（小鼠建议采取摘眼球取血，如果血样有限在试验方案允许的前提下可以取多只小鼠血样混合）。

三、样本编号

样本标号：

组别及样本标号，要在管壁上标注清晰，特别注意6，9的区分，可以使用英文标注。切记提供我司样本清单。

一、细胞收集及保存

1、贴壁细胞胰酶消化后900转5min离心至管底（非贴壁细胞直接离心），弃上清，将细胞冻存与-80度长期保存，-20度，暂时保存。若用于Q-PCR尽量使用灭菌无RNA酶离心管，trizon或RNA样本保存液中-80度长期保存。

2、组织样本取样后立即-80或者液氮保存。后续用于Q-PCR的取样后立即存于液氮或者-80度环境中，或者放于有trizon或RNA样本保存液的灭菌无RNA酶离心管中-80度保存。

二、样本运输

短时2h左右冰袋或者液氮运输，干冰（干冰可以维持-70度）密封邮寄运输。

三、样本编号

样本标号清晰，切记提供我公司样本清单。

1、动物组织提取后（玉米粒大小即可）迅速保存于4%多聚甲醛中固定，管体标号，组织块尽量少带血液，或可以用多聚甲醛将样本稍作清洗，常温保存，常温运输。做电镜的样本由2.5%戊二醛固定于15ml离心管内，样本直径小于2mm，常温保存常温运输。提供我公司样本清单。

2、细胞样本制作成爬片后PBS浸润保存与细胞培养板内，密封常温运输。做电镜的细胞离心收集好后2.5%戊二醛固定，常温运输。