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同源重组引物annealed bases要多少个?

相关实验:质粒构建技术

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tuweicao

从纯化的质粒进行pcr,我设计的引物同源臂20碱基,与基因互补的碱基15个,这样会p不出来吗?

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3 个回答

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毛利小五郎的徒弟

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15-20这个范围还可以,超过30就不好p了

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小小小小小芳

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这样会p不出来,引物长度 引物长度应该在18-25个碱基对之间,过短的引物容易出现非特异性扩增,而过长的引物则会降低扩增效率

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粥辰辰辰辰

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会、引物与非特异扩增序列的同源性不要超过70%或有连续8个互补碱基同源。

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