相关实验:质粒构建技术
tuweicao
2023-07-24
从纯化的质粒进行pcr,我设计的引物同源臂20碱基,与基因互补的碱基15个,这样会p不出来吗?
毛利小五郎的徒弟
15-20这个范围还可以,超过30就不好p了
小小小小小芳
这样会p不出来,引物长度 引物长度应该在18-25个碱基对之间,过短的引物容易出现非特异性扩增,而过长的引物则会降低扩增效率
粥辰辰辰辰
会、引物与非特异扩增序列的同源性不要超过70%或有连续8个互补碱基同源。
相关问答
问
想问一下,构建含特定RNA序列的质粒与含该RNA表达蛋白序列的质粒,在构建过程中,序列选择有何不同。
用同源重组的方法构建载体,结果amp板上一个菌都没长
同源重组连接产物可以用于电转吗
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