丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

双酶切,5000marker,应该是2000bp的目的片段和2500bp的载体片段,这个图完全不知道怎么解释

相关实验:克隆化的 PCR 产物连入 T 载体

user-title

酒鬼的余额宝


wx-share
分享

3 个回答

user-title

晓雨知春来

有帮助

可能是载体seqs存在变异,插入片段大小不准确。

user-title

loveliufudan

有帮助

根据你描述的双酶切实验情况,我的分析见解如下:


1. 这可能是因为载体内源性酶切位点被激活了,导致载体发生降解,所以实际插入片段小于2500bp。


2. 也可能是载体seqs存在变异,导致酶切位点变异,插入片段大小不准确。


3. 还可能是载体查询的seqs信息不准确,实际载体大小本身就小于2500bp。


4. 建议重新测序验证载体大小,或者设计新的酶切位点组合进行验证。


5. 如果时间允许,可以进行南方杂交,以确定插入片段大小。


6. 优化连接反应条件,提高效率,可能可以看到完整的4500bp条带。

user-title

土井挞克树

有帮助

可能是酶切位点的问题,内切酶不够专一产生了多个酶切位点导致的多个酶切条带

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序