【求助】关于肠激酶对C末端序列识别酶切的问题

如果您的目的蛋白的C端刚好存在一个肠激酶识别位点（DDDDK），但该位点后是终止密码子，即没有其他氨基酸残基，使用肠激酶切除N端的标签可能会对您的目的蛋白产生影响。

一般情况下，肠激酶会识别并切除蛋白质N端的标签，但如果目的蛋白的C端没有足够的氨基酸残基，切除标签后可能会导致蛋白质的不稳定性、不折叠或降解。因此，在这种情况下，使用肠激酶切除N端的标签可能不适合。

您可以考虑以下几个选择：

1. 考虑使用其他方式去除标签：如果可能，您可以尝试使用其他方法去除蛋白质的标签，例如利用特定的化学反应或其他蛋白酶进行切割。

2. 修改目的蛋白的表达构建：如果可能，您可以修改表达构建，使得目的蛋白的C端具有足够的氨基酸残基，以便在切除标签后保持蛋白的稳定性和功能。

3. 考虑其他标签系统：如果您发现标签的切除对目的蛋白产生影响，您可以考虑使用其他类型的标签系统，以便在表达和纯化过程中更容易去除标签，同时不会影响目的蛋白的稳定性和功能。

相当于你把终止密码子切除了，可以转到质粒上再进行切除。