易错pcr如何才能p出亮的条带

主要是你要用到特异性高的引物，然后循环时间多一点

以下是一些可能影响PCR扩增效果和条带亮度的问题及解决方法：

引物的设计和浓度。引物是PCR反应的基础，引物的设计合理与否，引物的浓度是否适当，都会影响PCR扩增的效果和条带的亮度。引物设计时应尽量避免引物间的二聚体、非特异性扩增等情况。引物的浓度过高会导致产物过多，太多会引起primer-dimer的形成，导致结果混乱，而浓度过低则可能导致PCR产物较少，条带亮度偏弱。因此，要合理设置引物的浓度，一般建议浓度为0.1-0.5 μM。

模板的纯度和浓度。模板的纯度和浓度也会影响PCR扩增的效果和条带的亮度。模板含有杂质或纯度较低时，可能会抑制PCR扩增效率，影响条带亮度。另外，模板的浓度也要适当，过低的浓度会导致扩增效率低，条带亮度偏弱，而过高的浓度则可能引起PCR抑制或非特异性扩增。

反应体系的组成和浓度。反应体系的组成和浓度也是影响PCR扩增效果和条带亮度的重要因素。反应体系中不同组分的比例、浓度等会影响PCR的特异性、扩增效率和条带亮度。例如，缓冲液的pH值、Mg2+离子的浓度、dNTPs的浓度等都会影响PCR扩增效率和条带亮度。

保证扩增效率稳定，条带基本不会太差：

1.保证引物设计合理，保证扩增效率。

2.摸索引物的退火温度，可以做个温度梯度PCR摸索下最佳退火温度，这样可以提高引物扩增效率。3.DNA模板，浓度过低条带暗，浓度过高，PCR反应会受到抑制，扩增效率不高，保证DNA的纯度，可以得到理想条带