基于化学诱变法产生随机突变体

化学诱变法（chemical mutagenesis）是将 DNA 片段暴露于化学诱变剂如亚硝酸、羟胺、亚硫酸氢盐或阱，然后将 DNA 片段克隆形成一个小的文库，再用适当的方法进行各个克隆的表型鉴定以及进一步的序列分析，以确定突变与表型之间的关系。有多种化学诱变剂可用于产生随机突变。如甲基磺酸乙酯(ethyl ethanesulfonale, EMS)可以使 DNA 链上的碱基发生烷基化，造成DNA复制错误；亚硝酸可引起腺嘌呤或胞嘧啶脱氨基，导致 A/T 转为 G/C 或反之。丝裂霉素 C（mitomycin C，MMC）、双环氧丁烷（diepoxybutane， DEB）、甲基甲烷磺酸盐（methyl methane sulfonate，MMS）等也是常见的化学诱变剂。化学诱变法虽然简单、经济，但也存在明显不足，如突变率难以控制、回收效率较低且大多数诱变剂发挥作用时具有碱基特异性，在诱变的过程中还会产生大量的无用突变等。

原理

化学诱变法的基本原理是将 DNA 片段暴露于化学诱变剂如亚硝酸、羟胺、亚硫酸氢盐或阱，然后将 DNA 片段克隆形成一个小的文库，再用适当的方法进行各个克隆的表型鉴定以及进一步的序列分析，以确定突变与表型之间的关系。有多种化学诱变剂可用于产生随机突变。如甲基磺酸乙酯(ethyl ethanesulfonale, EMS)可以使DNA链上的碱基发生烷基化，造成DNA复制错误；亚硝酸可引起腺嘌呤或胞嘧啶脱氨基，导致 A/T 转为 G/C 或反之。丝裂霉素 C（mitomycin C，MMC）、双环氧丁烷（diepoxybutane， DEB）、甲基甲烷磺酸盐（methyl methane sulfonate，MMS）等也是常见的化学诱变剂。