EMSA实验中纯化蛋白的量和已标记探针的比例是多少？

对每一个特定的结合蛋白和探针，所用纯化蛋白的摩尔数是标记探针的5倍。

在EMSA实验中，纯化蛋白的量和已标记探针的比例可以根据实验需求和样品特性进行优化和调整。以下是一些常见的建议：

纯化蛋白的量：纯化蛋白的量可以根据蛋白质表达量、纯化效率、实验需求等因素进行优化和调整。一般来说，建议在0.1~2 ug的范围内加入纯化蛋白。

标记探针的比例：标记探针的比例可以根据探针的标记效率、实验需求等因素进行优化和调整。一般来说，建议在50~200 nM的范围内加入已标记的探针。

根据你提供的实验条件，蛋白浓度为0.3ug/ul，已标记探针的浓度为100nM，加入的反应体系中，探针与蛋白的比例为1:30。这个比例在一定范围内是可以接受的，但是如果实验结果没有出现预期的条带，可以考虑优化实验条件，例如调整探针的浓度或者蛋白的浓度，或者增加反应时间等。此外，需要注意保持实验过程中的严密性和稳定性，以确保结果的可靠性。

一般纯化蛋白和标记探针的比例是1:100