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菌p的条带跑胶5分钟时还有,但是跑胶结束时就没有了,或者5分钟时是2/3/4比较亮,但是结束时2/3/4就很暗了,反而5分钟时很暗的7/8/9,跑胶结束时变成了最亮的,但是marker都是正常的,是怎么回事?谢谢。还有为什么胶回收前只有一条带但是胶回收后出现了一条新的非特异性条带,谢谢
清澈的微风
因为EB往负极移动,电泳时间越久,条带处亮度越弱。PCR条带出,没有EB了,背景会变暗,相对高背景处,条带基本看不清晰,甚至看不到。
建议:电泳液高于胶面1毫米左右,不要太多,不要多天使用同一电泳缓冲液,醋酸会挥发。
毛利小五郎的徒弟
酶切不完全可能出现挨着很紧的两条带。隔很远可能在回收过程中发生的降解,以及胶回收时,没有复性完全,部分任然一单链存在
loveliufudan
在跑凝胶电泳时出现条带消失或变化的情况,通常是由于蛋白质发生了变化引起的。这种变化可能是由于蛋白质的氧化、过氧化或温度变化引起的。
对于凝胶回收前只有一条带,而回收后出现了一条新的非特异性条带,这可能是由于凝胶回收过程中所使用的溶剂或其他因素导致的。例如,如果回收过程中使用的溶剂有较高的pH值,则可能会引起蛋白质的结构变化,从而导致新的条带出现。
在这种情况下,我建议你考虑使用其他溶剂或方法来进行凝胶回收,看看是否能够避免这种问题的发生。此外,你还可以考虑使用其他方法,例如超声波等,来帮助溶解凝胶中的蛋白质,以便进行分析。
huarenqiang5
考虑你的电流和电压是否有问题,建议用90V的电压,把电流提高些试试看。