jmzwg
我把PCR产物泡电泳胶,180v 18min 电流400,第一次跑完只有,溴粉蓝大概在胶的中部,我去照胶,有弥散条带,有两个弥散条带,(因为套氏PCR,我先看看外套),但我又拿去跑了一会,看到溴酚蓝在下部了 拿出来照胶,发现什么都没有了,想请教下出现这个问题的原因,以及溴酚蓝还在但是DNA条带却没有了的原因。谢谢。
如图,是第二次照胶的结果,第一次忘记保存了,喔上样量10μl。2-4孔上样。
镍钴镍钴镍
有没有可能你看到的是是二甲苯氰呀?undefinedloading中有两个指示剂,比1undefined的多一个,显示为蓝色,指示条带大概在3000bp左右。
毛利小五郎的徒弟
有几种可能
首先,胶的方向没放对,有可能从侧面或者后面跑出去了。你再跑电泳时要确定梳子孔的方向要与电流方向垂直。
其次,电泳时间过长。可以缩短电泳时间,或者做浓度更高的胶,比如1.5%或者2%的胶。
第三,还可能是你的琼脂糖有问题。
jmzwg
您好,如果是电泳时间的话,我之前大概180a,跑了28min吧,条带消失了 但是溴粉蓝还在,我上网查过,溴粉蓝在琼脂糖大概就是400个bp的电泳速度,我的产物是要比它大的,为什么还是琼脂糖在,但产物确不见了呢。
胶的话,我是0.3g,30ml tae,也不知道问题在哪里,谢谢。